R&D Systems試劑盒的操作步驟:樣品收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、加酶標(biāo)抗體、洗板、顯色、終止反應(yīng)、讀數(shù)、結(jié)果判定。
實驗過程
溶液配制:容器、溶劑、藥品
樣品處理:儀器、耗材
檢測過程:時間、溫度
結(jié)果分析:酶標(biāo)儀、軟件
R&D Systems試劑盒注意事項
樣本處理過程:均質(zhì)、離心
溶液配制過程:稀釋
前處理過程:稱樣、渦動、離心、取上清、氮吹
檢測過程:加樣、洗板、溫度及時間
分析過程:稀釋系數(shù)、濃度單位
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)期前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配制洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種組份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
8. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
R&D Systems試劑盒需要遵循的3個要點(diǎn)
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與樣本中相應(yīng)抗原或抗體的量成比例關(guān)系的,可根據(jù)已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。