數(shù)字PCR突變檢測介紹
數(shù)字PCR(digital PCR,dPCR)通過將微量樣品進行微滴化處理,即稀釋和分液,直每個細分樣品中所含有的待測分子數(shù)一般不超過1(0或1)個,將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴。再將所有微量樣品在相同條件下進行PCR擴增反應,使含有目標分子的微量樣品中的目標分子增加成千上萬倍,產生強的熒光信號,后對發(fā)生了擴增反應的微量樣品進行統(tǒng)計,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。
數(shù)字PCR技術在稀有突變檢測、microRNA表達、無創(chuàng)產前篩查、拷貝數(shù)變異、測序文庫定量、評估基因編輯效率(GEF)等方面有著很大的應用潛力,未來將會得到進一步的發(fā)展。
技術原理
技術優(yōu)勢
1、高靈敏度:通過放大單分子信號,有效消除背景噪音。
2、高準確性:能夠實現(xiàn)定量初始模板中的分子數(shù)。
3、檢測限超低:能夠檢測出微量突變和低拷貝量分子。
與普通熒光定量PCR的區(qū)別
傳統(tǒng)的實時定量PCR(qPCR)技術依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,是一種相對定量技術。在靶分子數(shù)目極少或者模板濃度差異細微時,其檢測靈敏度、度都受到很大限制。
作為第三代PCR技術的數(shù)字PCR,通過精細的微滴化處理,能夠直接檢測統(tǒng)計目標核酸分子的數(shù)目,不再依賴任何參照,可確定低單個待測核酸分子,實現(xiàn)定量。
服務內容
1、項目咨詢,包括樣本類型,基因和檢測突變位點的選取。
2、DNA樣本的提取和質檢。
3、引物和探針的設計、合成與優(yōu)化。
4、實驗操作。
5、數(shù)據(jù)分析和項目報告。
服務流程
1、提交項目課題相關需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術團隊討論項目細節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進行修改。
4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術服務合同。
5、開展實驗,按期完成合同規(guī)定的內容。
6、結題,提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實驗材料和儀器,滿足項目課題實驗需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實驗室。
4、數(shù)據(jù)結果交付周期快。
5、完善的服務體系,全程跟進,確保滿意。
咨詢與訂購
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