Meridian高特異性高保真Pfu酶是一種基于核酸適配體的熱啟動高保真DNA聚合酶,非常適合常規(guī)測序、NGS文庫擴增和用于克隆和蛋白表達的DNA片段擴增。Pfu 高保真熱啟動聚合酶的高度持續(xù)合成能力給PCR 反應提供了非常高的產(chǎn)量和靈敏度,以及針對GC-和AT -富集靶點的出色擴增。DNA適配體可逆地與聚合酶結(jié)合,在室溫下抑制其活性,并在室溫條件下防止非特異性擴增。
MeridianPfu酶預混液具有高靈敏度和高產(chǎn)量的特點,對1.2 kb的F8基因片段進行PCR擴增。 對人類基因組DNA進行5倍序列稀釋。所有反應均根據(jù)不同供應商推薦的條件設置,標記物為HyperLadder™ 50bp(BIO-33054).結(jié)果表明,使用Pfu高保真熱啟動聚合酶擴增DNA時,產(chǎn)物的產(chǎn)量和敏感性都更高。
對高GC含量 (20-70%) 的DNA的高效擴增
對人類基因組DNA以下基因進行擴增:RBB8 161bp (29%GC)、RBB8 450bp(32%GC)、IL10 417bp (44% GC)、Mpex418bp (55%GC)、 EGFR 525 bp (62%GC), EGFR380 bp (65% GC)。 標記物為HyperLadder™ 50 bp(BIO-33054)。結(jié)果表明,Pfu 高保真熱啟動聚合酶對所有GC含量的擴增效率相似,證明了它適用于需要低GC偏差的擴增。
適用于含有高抑制劑樣本的多重擴增
對20%全血樣本中6個靶標進行多重PCR擴增。Pfu熱啟動高保真聚合酶對含有EDTA的全血顯示出更好的擴增效率。
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