基于對腫瘤生物標志物特定分析的qPCR和RT-qPCR技術具有較高靈敏度,目前被廣泛用于液體活檢CTC 和ctDNA的鑒定。相對于基因測序來說,PCR技術更快速、易操作、成本低。然而CTC和ctDNA的分離通常需要新鮮血液樣品或其他能夠立即處理的樣品,并要求短時間內(nèi)對其分析,這在某種程度上限制了應用。
邁迪安公司推出的抗抑性qPCR預混液(MDX013)是開發(fā)檢測CTC和ctDNA的液體活檢產(chǎn)品的理想選擇。這兩種預混液可以從血液、尿液或唾液等樣本中直接擴增目標DNA或RNA。在有抑制劑存在的情況下,使用這兩種抗抑性產(chǎn)品可以提高qPCR效率,便于開發(fā)出更簡單、快速、靈敏的癌癥生物標志物檢測產(chǎn)品。
通過對含有多種已知PCR抑制劑的樣本,如全血和生物 液體以及粗組織裂解液中擴增,每反應中添加20%樣本,測定PCR反應效率。 結(jié)果表明,在有多種PCR抑制劑存在時,抗抑性qPCR預混液的反應效率保持在90-110%之間。
對不同液體樣本類型(尿液,牛奶和脊髓液)的有效擴增
將基因組DNA連續(xù)稀釋10倍后加入腦脊液、人尿或牛奶中,使用抗抑性qPCR 預混液(綠色)和KAPA Probe Force 預混液(紅色)DNA擴增。
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