DNA的提取方法
DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟,裂解是破壞樣品細胞結構,從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質徹d分離的過程。下面讓我們一起來看看DNA的提取方法都有什么吧!
一、高鹽沉淀法
高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一種變體,它簡化了酚氯仿抽提的繁瑣操作,并克服了其缺點,只是得到的DNA純度不夠穩(wěn)定。
二、酚氯仿抽提法
酚氯仿抽提是一種有效的蛋白質去除方法,但如果裂解體系中的蛋白質含量超過了其飽和度,蛋白質就無法完q去除,需要進行多次反復抽提,而每次抽提都會導致核酸的損失。酚氯仿抽提的大優(yōu)勢在于成本低廉,對實驗條件要求較低。
三、柱式法
過柱法利用特定的固相介質,在一定條件下,選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質和鹽,實現核酸與蛋白質及鹽的分離。這是目前廣泛使用的試劑盒提取方法。
離心柱法DNA提取具有比傳統的酚氯法提取更高的純度,有利于RNA保護,并且能夠進行微量操作。由于其低廉的價格和相對便捷的操作,逐漸取代了傳統的DNA提取方法,受到了高校科研等市場的廣泛認可。
四、磁珠法
該方法將純化介質包覆在納米級磁珠表面,通過介質對DNA的吸附,利用外加磁場使DNA附著于磁珠并定向移動,從而實現核酸與其他物質的分離。磁珠法的優(yōu)勢在于提供高質量、高通量的核酸提取效果,滿足現代對提取效率的需求;它具有高靈敏度(只需微量樣本)、分離速度快(磁場分離僅需幾秒鐘)的特點。
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